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熒光定量PCR檢測廠家

簡要描述:熒光定量PCR檢測廠家由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前已得到廣泛應用;實時熒光定量

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  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-05-13
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熒光定量PCR檢測廠家與普通PCR的區別:理論上PCR是一個指數增長的過程,但是實際的PCR擴增曲線并不是標準的指數曲線,而是S形曲線。

熒光定量PCR檢測廠家這是因為隨著PCR循環的增多,擴增規模迅速增大,Taq酶、dNTP、引物,甚至DNA模板等各種PCR要素逐漸不敷需求,PCR的效率越來越低,產物增長的速度就逐漸減緩。當所有的Taq酶都被飽和以后,PCR就進入了平臺期。由于各種環境因素的復雜相互作用,不同的PCR反應體系進入平臺期的時機和平臺期的高低都有很大變化,難以精確控制。所以,即使是96次PCR重復實驗,各種條件基本*,所得結果有很大差異,所以在實驗過程中我們不能根據zui終PCR產物的量直接計算出起始DNA拷貝數。
技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前已得到廣泛應用;實時熒光定量
的方法:熒光定量PCR所使用的熒光化學可分為兩種:熒光探針和熒光染料。而熒光定量 PCR 的方法相應的可分為特異類和非特異類兩類,特異性檢測方法是在PCR反應中利用標記熒光染料的基因特異寡核苷酸探針來檢測產物;而非特異性檢測方法是在在PCR反應體系中,加入過量熒光染料,熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射出熒光信號。前者由于增加了探針的識別步驟,特異性更高,但后者則簡便易行。

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